Hijo de Fernando de Castro, cabeza de una de las familias más distinguidas de la ciudad de Évora, célebre por su aristocracia. A causa de su apoyo a la entronización de Felipe II en Portugal, Fernando de Castro obtuvo el título de conde de Basto, que heredó su hijo.

Éste protagonizó su primer servicio notable a la dinastía de los Avís acompañando al rey Sebastián en la batalla de Alcazarquivir el 4 de agosto de 1578, donde el monarca perdió la vida y Diego de Castro fue hecho prisionero. Su liberación, como la de tantos nobles lusos, se debió a la intervención de Felipe II, responsable de efectuar el rescate. Bajo el régimen de los Austrias, el conde de Basto conoció una carrera de éxitos imparable, similar de las de tantos otros aristócratas portugueses. Sus servicios fueron principalmente militares. [...]